KRAS/BRAF基因突变检测
1、临床意义
KRAS基因是人体肿瘤中常见的致癌基因之一。该基因的突变多见于多种恶性肿瘤,在肺癌患者中的突变率约为15~30%,在结直肠癌患者中的突变率约为20~50%。临床研究表明,KRAS基因突变状态与非小细胞肺癌对吉非替尼、厄罗替尼等靶向治疗药物的原发性耐药相关,直肠癌症患者中KRAS的突变对西妥昔单抗等药物的耐药性有关。
KRAS基因突变的转移性结直肠患者对西妥昔、帕尼单抗等EGFR靶向治疗药物产生耐药,根据检测结果决定是否使用EGFR靶向药物作为临床治疗措施。目前,KRAS基因检测已被欧美地区列为大肠癌患者内科治疗前必做的常规检查。KRAS基因突变检测已被美国癌症综合网络(NCCN)的《NCCN结肠癌临床实践指南》与《NCCN直肠癌临床实践指南》列为临床用药必检项目。因此,KRAS突变对西妥昔单抗、帕尼单抗在结直肠癌患者的治疗具有重要的指导意义。
BRAF 绝大部分突变形式为BRAF V600E 突变,主要发生于黑色素瘤、结肠癌和甲状腺癌中。在结直肠癌患者中,BRAF基因突变率为15%,在使用爱必妥或帕尼单抗等靶向药物时,须检测肿瘤组织KRAS基因状态,如果KRAS无突变,应考虑检测BRAF基因状态。在黑色素瘤患者的治疗方面,BRAF基因在原发性黑色素瘤中突变率为80%、在转移性黑色素瘤中突变率为68%、在良性痣中的突变率高达82%。
目前,BRAF基因检测已被欧美地区列为大肠癌患者治疗前必做的常规检查。针对BRAF基因突变所研发的新型靶向药物威罗菲尼对于BRAF基因突变阳性患者疗效显著。人类BRAF基因V600E突变基因检测对于指导治疗结肠癌、黑色素瘤患者具有非常重要的意义。
2、检测服务描述
本检测服务基于多重PCR技术和毛细管电泳相结合的方法对KRAS和BRAF基因进行快速、准确、高效的检测。在一个PCR反应中对两个基因的相关位点进行PCR扩增,然后根据扩增片段大小不同,经毛细管电泳分离得出检测结果。
3、技术优势
高通量:一个反应可检测多达160个基因突变,扩大靶向药物相关基因检测空间。
高特异性:特殊的PCR引物设计、优化的PCR反应条件,保证突变基因的特异性扩增。此外,我们选择中国人群中突变频率较高的几十个致病突变进行检测,使检测更具针对性。
高效率:相同检测时间,效率提高8倍以上。
高精确度:精确至一个碱基差别的分辨率,得以精准区分各种基因突变。
高灵敏度:能达到与荧光定量PCR同等的灵敏度。
低成本:高检测通量保证低检测费用,适用于更大的消费者群体。
4、适用机型
ABI3500、常规PCR仪。
5、样本类型及要求
石蜡组织切片10μm厚度3-5片,DNA样本浓度50ng/μl,OD值260/280值在1.8-2.0之间,无明显降解,无RNA污染。
6、检测流程
7、检测周期
3-5个工作日完成样本检测。