答:由于EGFR突变为非遗传性突变,我们不建议使用血液等DNA来进行检测,因为这些DNA中发生突变的概率很低,对于BRCA等检测是可以使用血液和口腔细胞作为检测的样品的。
答:基本没有影响。对于初始DNA量较低,我们推荐在进入毛细管电泳时,降低稀释倍数,对于初始DNA量我们说明书中会有详细的要求。
答:不推荐使用琼脂糖电泳来判断结果。主要原因有1我们的PCR产物大小均在100-300间,而且不同的突变位点它们之间的产物大小差距在1-5个碱基,普通的琼脂糖凝胶分辨率根本达不到;2我们的引物均是带有荧光标记,在3500上结果非常直观明显。
答:在说明书中对于稀释倍数我们均有推荐的倍数,但是这个要依据不同样品初始量和样品的质量有关,您可以根据这两个参数来相应的调整稀释倍数,但一般的样品建议使用推荐的倍数。
答:出现这个情况主要是由于毛细管上样量较大引起的,降低上样量或加大稀释倍数可以解决这个问题。
答:对于阳性峰的判断我们再说明书中有详细的说明,我们推荐综合所提供的阳性对照,阴性对照和内参三个指标来整体判断,若目标峰较弱,也可以降低稀释倍数来确认。
答:首先测序法步骤较多,时间较长,而且灵敏度只有20%左右,PCR法对于较多位点时需要反应管数较多,对于初始样品量要求较大,而且PCR法只能定性来判断结果,我们公司的多重PCR和毛细管相结合的方法,灵敏度可以达到1%,而且在一个反应管中可以同时检测高达上百个突变位点,对初始样品量要求较低,节约成本,同时反应稳定准确。